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1、配制培养基:常用的培养基为马铃薯葡萄糖琼脂培养基或马铃薯蔗糖琼脂培养基。

2、种芝选择:所选种芝应从原基形成期开始标记,选择出芝早、子实体完整、柄短粗壮、颜色均匀的个体,待长至七八成熟时采下。
3、灵芝菌盖表面消毒:将采回的种芝剪去菌柄,除掉菌盖上粘附的杂质,放入无菌室或接种箱内的0.1%升汞溶液内,浸泡1~2分钟,取出用无菌水冲洗两次,用无菌纱布吸干表面水分。
4、灵芝孢子收集器制作及灭菌:灵芝孢子收集器可自己制作。用一个直径为13厘米的培养皿作底盘,盘中放一直径为9厘米的小培养皿,用来收集孢子。小培养皿中放一不锈钢支架,用来支撑种芝。用一直径为12厘米的玻璃漏斗罩着小培养皿,漏斗口用棉塞塞好。制好的孢子收集器用双层牛皮纸包好,放入灭菌锅内灭菌。
5、灵芝孢子的收集:将灭菌后的孢子收集器放入接种箱,在无菌条件下把处理过的种芝插在收集器不锈钢架上,盖上漏斗。沿漏斗下沿四周放一条纱布,在大培养皿中倒入0.1%升汞溶液,以浸透纱布为度,防止外界杂菌透过缝隙进入漏斗。再将孢子收集器放入恒温箱,温度调至25℃。两天后,灵芝担孢子开始弹射,并落在小培养皿内,可透过玻璃漏斗看到培养皿底部散落的棕色孢子。
6、灵芝孢子的培养:把孢子收集器重新放回接种箱内,在无菌条件下,用接种环粘取少量孢子接种到试管的斜面培养基上,然后将这些试管放入25℃~28℃的恒温箱内,经过7天左右,孢子会萌发成菌丝。选择孢子萌发早、菌丝长势旺盛的菌落,将菌丝转接到新的试管中,再经7天培养,菌丝会发满全管,即得灵芝母种。
采收标准与采收方法:采收标准灵芝离采收前7天,停止喷水,棚内空气相对湿度逐步恢复到70%。子实体开始弹射孢子后,约经20~30天菌盖变硬。以红棕色有光泽,上面落一层孢子粉,菌盖边缘内卷,有一道凸出的边缘埂时作为采收的标准。采收前注意收听天气预报,有两三天晴天时采收。江苏地区春栽灵芝在6月底~7月初采收。夏栽灵芝在9月底至10月上旬采收。采收方法采收时,左手稳住菌袋,右手抓住灵芝轻轻扭转,就可从袋上采摘下来,随即到室内用锋利的刀在距菌柄2厘米长处,将柄切去。
菌柄不足2厘米的,刀削去菌料,削平菌柄,随时放在水泥地面上推晒、连縷曝晒3个太阳,在灵芝的含水量达12%~13%时,就可以分级包装贮藏商品灵芝的规格、等级标准与贮存商品灵芝的规格赤芝,不是畸形,完整的,无杂斑,无虫蛀、霉变、杂质。菌柄红色,不带有培养基,长2厘米以内,含水量12%以下。商品灵芝的等级标准:一级灵芝:菌盖直径8~15厘米,厚度1厘米以上单朱重30克以上。二级灵芝:菌盖直径5~8厘米,厚度1厘米以上,单朵重15~30克。
灵芝的贮存灵芝晒干后容易吸湿发霉、虫蛀,所以晒干的灵芝分级后,按等级分别装人不破的大塑料袋内,每袋装干灵芝20~25千克,用卫生纸包一片磷化铝片放入袋内。灵芝多放入密闭的仓库内,因灵芝轻,体积大,所以磷化铝用量较大。磷化铝(ALP)是用红和铝粉在镁的燃烧下合成的种熏蒸剂,形状呈现为粉状,颜色为黄色亦者浅黄色。其组成成分为:磷化铝细粉70%,氮基甲酸铵26%,固体石蜡4%。当两种微量元素发生碰撞,活化的时候就会产生一种新的微量元素,例如二氧化碳等
每片磷化铝重约3克,可产生磷化氢1克左右。二氧化碳有辅助杀虫和灭火作用。磷化铝药片在25℃及相对湿度75%~85%时,经过12~15小时即可分解完毕磷化氢是无色但带有蒜臭气味的气体,沸点-87-5C,熔点-133.5C,气体比重1.183。它稍溶于冷水,不溶于热水稍溶于酒精、乙睢和氯化铜溶液。磔化氢气体具有毒力大、渗透性强、在储藏物中扩散速度快、对粮食种子发芽力的影响小、残毒小等优点。
灵芝子实体成熟后会弹射大量的孢子,这时要停止往子实体表面喷水,否则会影响孢子粉的采集。用塑料布或纸在菌盖下面铺好,待孢子粉弹射后,收集起来。也可在每个子实体上套上一个纸套,但要注意防止碰伤子实体,过多的碰撞会阻止孢子的弹射。孢子粉收集后,及时干燥过筛,除去杂质,放人干燥瓶中保存。
孢子粉是自然界中真菌繁殖后代的生命体,它可长时间、恶劣干燥环境下,持久地蕴藏生命力,一旦外界条件适宜,孢子粉落入潮湿、有培养料的环境下,便开始新一轮生命的循环。在灵芝孢子粉的应用方面,主要有两种应用,一是长期品种资源保存和异地种植栽培;二是医学应用,近几年来,医学工作者发现破壁孢子粉有抗和辅助放、的作用。